D-димер

 

AUTO D-Dimer, "TRINITY BIOTECH"

Д-димер Авто (AUTO D-Dimer)

Иммунотурбидиметрический тест для количественного определения Д-димера в нитратной плазме человека.

Номер по каталогу:    CRS126-B Набор на 112 определений

НАЗНАЧЕНИЕ

Набор для количественного определения продуктов деградации фибрина, содержащих Д-димер, в нитратной плазме человека с использованием метода агглютинации полистироловых микрочастиц, для автоматических коагулометров.

КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ

В результате активации системы гемостаза в качестве конечного продукта образуется стабилизированный или пере­крестно-сшитый фибрин. В процессе образования фибрина происходит гидролиз молекул фибриногена, в результате чего открываются концевые участки, позволяющие образовываться сшитым четвертичным комплексам фибрина, тка­невому активатору плазминогена и плазминогену, с последующим образованием плазмина. Плазмин, в свою очередь, расщепляет перекрестно-сшитый фибрин с образованием продуктов деградации фибрина (ПДФ). Под действием фак­тором XIII (трансглутаминаза) между С-концами, прилегающих друг к другу у-цепей фибрина (или фибриногена), об­разуются сшивки (лизин-глутамин). Глобулярные домены, содержащие такие у-цепи, стали называть Д-доменами, а продукты деградации фибрина, содержащие соседние Д-домены, сшитые фактором XIII, называют Д-димерами. Повышение содержания Д-димера в плазме крови свидетельствуют об активации процессов свертывания с образова­нием перекрестно-сшитого фибрина и последующим его протеолизом с образованием ПДФ, содержащих Д-димер. Повышенные уровни Д-димера наблюдаются при диссеминированном внутрисосудистом свертывании (ДВС), тромбо­зе глубоких вен (ТГВ), легочной эмболии (ЛЭ) и при других клинических состояниях, например, при злокачественных новообразованиях. Содержание Д-димера может возрастать при нормальной беременности, но при этом слишком вы­сокие уровни могут указывать на осложнения беременности. Следует отметить, что наличие высокого уровня Д-димера не является достаточным основанием для диагностики тромбозов. Однако отсутствие высоких значений этого показателя дает возможность исключить диагноз таких заболеваний, как ДВС, ТГВ или ЛЭ.

В настоящей методике используются полистироловые микрочастицы, покрытые ковалентно связанными монокло-нальными антителами к Д-димеру. Если в образце присутствует антиген Д-димера, происходит образование иммунно­го комплекса с этими антителами. Формирование комплексов приводит к увеличению оптической плотности реакци­онной смеси пропорционально концентрации антигена. Данная процедура обеспечивает количественное определение Д-димера в плазме.

Данный клинический показатель можно использовать для определения подходов к лечению пациентов. СОСТАВ НАБОРА

1. Реагент кат. № А 4592 ^ (4x2 мл)

Буферный раствор полистироловых микрочастиц покрытых мышиными моноклональными антителами MA-8D3 к Д-димеру. Содержит стабилизаторы и 0,095% азид натрия в качестве консерванта.

2. Буфер кат. № А 4717 (4x2 мл)

Буфер со стабилизаторами, рН=7,0. 0,095% азид натрия добавлен в качестве консерванта.

3. Разбавитель кат. № А 8719 (2x4 мл) 0,85% физиологический раствор

4. Калибратор кат. № А 7971 (2x1 мл)

Лиофилизированная плазма человека, обогащенная Д-димером фибрина. Концентрация в калибраторе указана в при­лагаемом листке-вкладыше.

ПОДГОТОВКА И СТАБИЛЬНОСТЬ РЕАГЕНТОВ

Храните набор в холодильнике при 2... 8°С. До вскрытия реагент и калибратор стабильны в течение срока годности, указанного на этикетках флаконов.

1. Калибратор: добавьте к содержимому флакона 1,0 мл дистиллированной воды. Осторожно перемешайте в течение 5 минут до полного растворения. Оставьте на 30 минут при температуре 18...26°С. Перед использованием осто­рожно перемешайте. НЕ ВСТРЯХИВАТЬ, не используйте для перемешивания механические средства. Стабильность 8 часов при 1 8.26°С или 3 дня при 2.8°С.

2. Реагент: перед использованием осторожно перемешайте, перевернув флакон несколько раз. Стабильность14 дней при 2...8°С. Не замораживать.

3. Буфер и Разбавитель: готов к использованию. Стабильность 14 дней при 2... 8°С. Не замораживать Для соблюдения условий стабильности следует вынимать реагенты из анализатора и хранить при 2.8°С.

© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2006 тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru

 

AUTO D-Dimer, "TRINITY BIOTECH"

ВЗЯТИЕ И ХРАНЕНИЕ ОБРАЗЦОВ

Кровь из вены собирают в пробирки с 3,2% (0,106 М) раствором цитрата натрия, соблюдая точную пропорцию: 9 час­тей крови + 1 часть антикоагулянта. При использовании коммерческих вакуумных пробирок необходимо обеспечить их полное заполнение. При этом необходимо исключить любые травмы или остановку кровотока (стаз). Кровь нельзя собирать через гепариновый замок или другие гепаринизированные линии. Образцы со сгустками не анализируются. Центрифугируют пробы при 1500g в течение 15 минут при комнатной температуре. Если не предполагается немедлен­ный анализ образцов, сразу после центрифугирования перенесите плазму в отдельные пластиковые пробирки. Храните образцы при 2.8 °С и анализируйте в течение 4 часов после взятия крови. Образцы можно заморозить и хранить в те­чение 1 месяца при -20°С; за 30 минут до проведения анализа разморозьте образцы при 37°С.

ПРОЦЕДУРА АНАЛИЗА

Адаптации для конкретных анализаторов высылаются после предварительного запроса.

Параметры измерения на коагулометре (405 нм):

Проба 30 мкл

Буфер 5 мкл

Инкубация 20 секунд

Реагент (стартовый) 70 мкл

Измерить ОП 1 через 3-5 секунд после добавления стартового регента.

Измерить ОП 2 через 300 секунд, после первого измерения. Рассчитать разницу ЛОП = ОП2 - ОП1. Расчет концентрации Д-димера в образцах проводится по многоточечной калибровочной зависимости, процедура по­строения которой приводится в адаптациях к коагулометру.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Все образцы пациентов исследуются без разведения. Аналитическая чувствительность составляет 15 нг/мл. Верхний предел измерения для образцов ограничен максимальной концентрацией калибратора. Если результат превышает верхний предел, разведите образец и повторите анализ. Эффект прозоны не наблюдается вплоть до концентрации Д-димера 60 000 нг/мл.

Повышенные уровни Д-димера могут сохраняться в течение некоторого времени после затухания активного процесса. Хотя отсутствие повышенных уровней Д-димера может быть использовано с целью исключения тромбозов, отрица­тельный ответ теста на Д-димер не полностью исключает наличие такой патологии. Для постановки диагноза и кон­троля лечения результаты теста на Д-димер следует использовать вместе с другими клиническими и диагностическими данными.

ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ

Границы референтного диапазона для данного метода оценивались на анализаторе АМАХ 190 Plus на образцах плаз­мы 137 здоровых взрослых добровольцев. Среднее значение концентрации Д-димера: 67± 26,7 нг/мл. Допустимая верхняя граница диапазона нормальных значений 1 47 нг/мл.

Каждая лаборатория должна самостоятельно уточнять границы референтного диапазона.

КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА

Достоверность получаемых результатов должна постоянно подтверждаться путем исследования в каждой серии изме­рений 2-х уровней контрольных материалов в нормальной и патологической области, таких как АМАХ ACCUMARK Авто Д-димер Контроль, уровни 1 -3. Каждая лаборатория ведет внутрилабораторный контроль качества для оценки приемлемости получаемых результатов. Если результаты контрольных материалов не укладываются в допустимые границы, необходимо провести повторную калибровку.

ОГРАНИЧЕНИЯ

Мутная или опалесцирующая плазма может стать причиной неустойчивых результатов, которые следует интерпрети­ровать с осторожностью. Результаты пациентов при наличии ревматоидного фактора следует также интерпретировать с осторожностью.

ПРИМЕЧАНИЯ

1 . Буфер, входящий в состав набора, обладает раздражающим действием при попадании на кожу, глаза и органы дыха­ния. В случае попадания в глаза, немедленно промойте их большим количеством воды и обратитесь за медицинской помощью. Пользуйтесь соответствующей защитной одеждой.

2. Буфер и Калибратор являются биологически опасными материалами. Биологические источники, из которых они бы­ли получены, проверены утвержденными методами на наличие HВsAg, антитела к ВИЧ-1, ВИЧ-2, вирусу гепатита С и при этом показали отрицательные результаты. Но, поскольку, ни один из методов тестирования не может дать гаран­тии на полное отсутствие инфекционных агентов, все используемые материалы следует считать потенциально опас­ными и обращаться с ними, соблюдая необходимые меры предосторожности.

© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2006 тел.: 737-0363, факс: 737-0365, 

Д-димер - зачем он нужен? Консультация гематолога даст ответ.